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NEFA 분석 키트 NEFA(산화질소)의 정량화를 위한 도구입니다. 이는 혈액이나 조직 샘플에서 NEFA의 농도를 결정하는 데 사용됩니다. NEFA는 에너지 대사, 심장 흥분성, 신경근 전도, 혈압 및 혈액 응고 조절을 담당하는 필수 영양소입니다. 주로 뼈, 근육, 연조직 및 적혈구에서 발견됩니다.
준비
NEFA는 DNA에 결합하는 능력을 가진 작은 50.2kDa 단백질입니다. 이는 비에스테르화 팔미트산을 생성하는 세포질 유형 I 지방산 신타제(FAS) 복합체입니다. 아실-CoA 산화효소(ACS)가 있는 경우 FAS 복합체는 3-메틸-N-에틸-N-(b-히드록시에틸)-아닐린을 아세틸-CoA의 분자 전구체인 4-아미노안티피린으로 산화시킵니다. 이 과정은 모든 진핵생물에게 중요한 효소 과정입니다.
NEFA는 지방량이 많지는 않지만 말초 조직의 중요한 연료원입니다. 간에서 대사되어 알부민과 복합체를 형성하여 말초 조직으로 운반됩니다. NEFA는 FAS 복합체의 티오에스테라제(TE) 도메인에 의해서도 방출됩니다.
피펫팅
ELISA 키트는 작은 화합물, 단백질 및 펩타이드를 검출하는 데 사용됩니다. 이 키트는 E.coli에서 발현되는 재조합 단백질을 기반으로 합니다. 키트에는 아자이드, 티메로살 및 기타 천연 자원이 포함되어 있지 않습니다.
키트에는 BSA, 발열원 없는 희석 완충액, 세척액 등의 시약이 들어 있습니다. 세척 용액은 2~8degC에서 2주 동안 안정적입니다. 희석 완충액에는 0.9% 생리식염수가 포함되어 있습니다.
키트에는 내부 NEFA 표준이 있습니다. 여기에는 샘플의 예상 농도와 일치하는 농도의 NEFA가 첨가됩니다. 546nm에서 청자색 안료의 흡광도를 측정하여 샘플 내 NEFA 농도를 계산합니다.
비색
WAKO NEFA 키트를 사용하면 무의미한 결과를 포함하여 다양한 결과가 도출되었습니다. 그럼에도 불구하고 NEFA 키트는 동물 조직 샘플의 상대적인 지방산 함량을 결정하는 데 있어 가치 있는 경쟁자입니다. 따라서 NEFA 키트는 가장 인기 있는 실험실 테스트 중 하나입니다. 키트에는 혈액, 혈청, 타액 및 다양한 지질을 포함한 다양한 유형의 샘플을 테스트하기 위한 지침이 함께 제공됩니다.
키트의 가장 흥미로운 부분은 지질에서 흔히 발견되는 지방산을 포함하여 다양한 지방산을 측정하는 데 사용할 수 있다는 것입니다. 이 키트에는 인간과 동물에서 발견되는 C-8 및 C-16 지방산을 포함하여 다양한 지방산을 검출하도록 설계된 다양한 효소가 포함되어 있습니다. 그럼에도 불구하고 이 키트는 넓은 범위에 걸쳐 고정밀 FFA 농도에 사용하는 것이 권장되지 않습니다.
전기화학
NEFA는 인간 건강에 중요한 지방산이지만 평가되는 경우는 거의 없습니다. 게다가 탐지 비용도 매우 비쌉니다. 따라서 농도 변화를 모니터링하는 것은 보다 정확한 질병 예방 및 관리에 도움이 될 수 있습니다. 본 연구에서는 PDA-MWCNT를 센서 표면으로 사용하여 NEFA용 전기화학 분석 키트를 개발했습니다. 이 전극은 NEFA 산화 단계에 대해 우수한 전기촉매 활성을 나타냈으며 실제 응용 분야에 사용될 수 있습니다.
효소 전극은 PDA-MWCNT와 ACOD, ACS 및 폴리머의 다층 복합막으로 구성되었습니다. 층의 순서는 효소 반응 순서와 일치하도록 선택되었습니다. ACS 및 ACOD가 필름에서 생물학적 활성을 유지하는 것으로 확인되었습니다.
T2D의 NEFA 농도
혈액 내 NEFA 농도는 비만과 고혈압과 관련하여 연구되었습니다. 이 화합물은 α1-아드레날린 자극을 통해 혈압 상승을 촉진하고 산화 스트레스를 증가시키는 것으로 나타났습니다. NEFA는 대사증후군과도 관련이 있습니다. 이 화합물은 고혈압 발병에 중요할 수 있습니다.
정맥 내 포도당 투여에 대한 혈장 NEFA 반응을 설명하기 위해 여러 모델이 제안되었습니다. 보스턴 모델은 NEFA 농도 증가의 네 번째 단계를 정확하게 묘사했습니다. 그러나 모델은 초기 대기 시간 단계를 설명하지 않았습니다. Fabian 모델은 이 단계를 설명하기 위해 간단한 지수 기울기를 사용했습니다. 마찬가지로 Thomaseth 모델은 반동 단계를 설명할 수 없었습니다.
트리글리세리드의 NEFA 수준
여러 연구에서 비만 수술이 혈장 NEFA 구성에 미치는 영향을 조사했습니다. 2016년에 발표된 메타 분석에서는 수술 후 6개월과 12개월에 혈청 NEFA 수치가 감소했습니다. 이는 인슐린 수치 감소로 인한 것일 수 있습니다. 또 다른 연구에서는 Roux-en-Y 위 우회술 전후의 비만 환자 그룹에서 혈장 NEFA를 측정했습니다.
7가지 NEFA의 농도는 수술 후 9개월에 감소했습니다. 리놀리에이트(오메가-6 지방산)는 18:2, 스테아르산염은 18:0, 올레산염은 16:0으로 감소했습니다. 그러나 도코사헥사에노에이트의 농도는 영향을 받지 않았습니다. NEFA는 지방산 메틸 에스테르(FAME)로 전환되었습니다. 그런 다음 이를 가스 크로마토그래피-질량 분석법(GC-MS)으로 분석했습니다.



